睪固酮與鰻魚人工催熟卵巢血管新生

添加睪固酮改善鰻魚(Anguilla japonica)卵巢人工催熟發育之探討-
改變血管新生基因表現量

鰻魚有複雜的生活史，其生殖生理至今仍不清楚，但其為重要養殖魚種，人工繁殖已研究多年，外源性腦下垂體萃取液為取得其受精卵的通用方法。但長期外源性激素導致卵細胞發育不同步，影響卵質與催產時間的判斷。雄性素已證明能刺激鰻魚銀化與同步卵細胞發育，在哺乳動物中，血管新生和卵巢濾泡發育關係密切而重要，但雄性素幫助鰻魚卵細胞發育是否也經由影響卵巢局部的血管新生並不清楚。為研究此現象，我們採用養殖鰻魚，每週施以鯰魚腦下垂體萃取液腹腔注射 (2個/千克體重)， 另一組萃取液添加睪固酮(3 g /千克體重)，共9週，無添加睪固酮組每三週採樣一次，第九週則全部採樣。卵巢VEGF, Flk PTEN 等基因表現量以RT-PCR進行分析，並以組織免疫染色進行蛋白質含量測試。結果顯示：在腦下垂體萃取液刺激下，GSI 顯著的 (p<0.05) 增加；但是VEGF 與Flk的卵巢表現量隨著處理日程有下降的趨向，而 PTEN則反而上升。同時，睪固酮的添加顯著的(p<0.01，與9週無添加組相較)提高腦下垂體萃取液對卵巢發育(GSI)的效果。 卵巢VEGF, Flk, Eph 受體, 與 Dll4 的表現量在第9週顯著的(p<0.05, 與第0 週相較)下降，而睪固酮的添加可以救援單獨以腦下垂體萃取液處理9週的結果，使和第0週無顯著(p>0.05)差異；Eph 受體的表現量更被添加睪固酮顯著的(p<0.01，與第0 週相較)刺激。此外，睪固酮的添加明顯 (p<0.01，與第9週相較) 抑制卵巢PTEN 與EDF-1 的表現量. 組織免疫染色的結果符合睪固酮的添加對卵巢濾泡細胞VEGF基因的刺激或PTEN基因的抑制效果。所以睪固酮的添加可改變卵巢血管新生相關基因的表現進而幫助卵細胞的發育。