Tuesday, December 11, 2018

雄性素對日本鰻初級卵巢發育反應性的探討

雄性素對日本鰻初級卵巢發育反應性的探討

鰻魚人工繁殖的操作是每週以腦下垂體研磨萃取液腹腔注射,以刺激性腺發育,而鰻魚之催熟成功率大約在50%-70%,無法從起始狀態判斷催熟成功的可能。同時在此過程中易發生卵細胞發育不同步的現象,影響誘導最後成熟時機的認定。雄性素被證明具有刺激鰻魚初級卵巢發育的效果,於腦下垂體研磨萃取液中添加雄性素,能卵濾泡對腦下垂體研磨萃取液的反應性。鰻魚是敏感的生物極易受擾動影響,故減少處理操作應是個發展方向。本試驗之目的為: 1.,建立種鰻篩選標準的依據; 2.發展技術以減少催熟試驗之操作次數而引起的逆境並節省人力和成本;3.
本試驗為減少施打操作次數以避免鰻魚因重複操作而影響催熟結果,試驗使用甲基睪固酮 (methyltestosterone)緩釋劑對日本鰻進行腹腔注射,緩釋劑之成分以豬油混合精製凡士林 (1:1,W/W) 為基底,甲基睪固酮的劑量為 2.5mg/Kg BW,施打體積為 1 ml。考慮因鰻魚個體差異過大難以判斷試驗成效,過去惟有增加樣本數才可能克服此問題,本試驗發展使用同一個體以手術方式取出卵巢,開刀完後四週再施打甲基睪固酮緩釋劑,比較同一個體處理前後卵巢的發育狀況,卵巢發育狀況以卵徑分佈機率圖 (n>80)判斷,追蹤有反應者與無反應者之卵巢原始差異,並建立基因轉錄組比較基因表現的差異和形質的關係。
結果顯示,施打含有甲基睪固酮緩釋劑四週後,卵徑顯著大於施打單獨緩釋劑或未施打開刀的,同時發現組於四週後相較於處理前卵徑皆有小幅度上升,推測原因為鰻魚因試驗條件(海水、低溫、避光、操作)促使卵巢輕微發育,無法認定然此結果對卵巢後續發育的影響。結果也顯示初始卵徑若小於0.08mm的,並不會因試驗條件或藥物而刺激發育。
基因轉錄組正建構中,本試驗下一步可以嘗試使用鮭魚腦下垂體(SPE)緩釋劑,進行後續卵巢發育階段的人工催熟,以避免鰻魚因逆境壓力對卵巢發育造成負面的影響。

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